潮黴素B Hygromycin B穩定轉染細胞的篩選
1) 轉染48h後，用含有適當濃度的潮黴素B篩選培養基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋後傳代)。
注意：細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷效果。則當細胞過于稠密，其效率會降低。爲了得到較好的篩選效果，將細胞稀釋至豐度不超過25%。
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。
3) 篩選7天後觀察並評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。
4) 挑取並轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板，繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。
5) 之後更換正常培養基培養即可。
潮黴素B Hygromycin B時的注意事項
1) 潮黴素B Hygromycin B的抗性基因(hyg或hph)除了來自E. Coli.之外，還發現于其他的菌株，包括Streptomyces hygroscopicus和Klebsiella pneumoniae。
2) 爲了您的安全和健康，請穿實驗服並戴一次性手套操作。